※ 引述《wanters (Reset)》之銘言:
: 作者: wanters (Reset) 看板: NTU_CK_CM
: 標題: 不幸...還在打報告
: 時間: Wed Mar 29 20:34:54 2000
: 群別____組別____實驗日期______助教姓名______
: 執筆人______系級____學號______同組者______系級____
: 學號______
: 一,實驗名稱:醣蛋白的定量分析
: 二,實驗目的:
: (a)測定蛋白質在水溶液中的濃度
: (b)測定醣蛋白中性糖部份的含量
: (c)估算醣蛋白分子的醣鍊數目
: 三,實驗過程:
: (A)蛋白質定量(適用於蛋白質濃度200-1000 g/ml):
: (a)取0.1ml transferrin以蒸餾水稀釋成1ml作成unknown a
: (b)取0.1ml ovalbumin以蒸餾水稀釋成1ml作成unknown b
: (c)取已洗淨烘乾試管14支置於架上編號
: (d)依表加入溶液:
: (e)每支試管加入5ml蛋白質定量試劑,攪拌均勻
: (f)二十分鐘後三十分鐘內,以第一支試管作blank,以波長595nm測定
: 各試管吸光度並記錄
: (B)糖類定量(適用於糖類濃度50-250 g/ml):
: (a)取已洗淨烘乾之試管8支置架上編號
: (b)依下表加入溶液:
: (c)每管加4ml Orcinol-H SO 糖類定量試劑,以多層parafilm
: 封口,並用針頭刺幾個小洞以防突爆,充分混勻
: (d)將之置80 c水浴鍋加熱15min,反應完畢後置室溫冷卻
: (e)
以第一支管當blank,測定每支試管在波長505nm處吸光度,並記錄
四,實驗結果:
五,數據分析:
六,注意事項:
(1)實驗時要依照步驟,定量試劑最後再加.
(2)分光光度計需先打開暖機十五分鐘才可使用.
(3)此次實驗之廢液需要回收,不可隨意倒入水槽.
七,討論:
(1)目前已知醣鍊最多可有幾個branch?
(2)糖分子的連接方式可有幾種?
(3)如要得到確實的糖鍊數目應如何為之?
(4)醣蛋白在生物體內扮演哪些角色?有何重要性?
(5)定量蛋白質濃度時,若溶液含有鹼性物質或detergent該怎麼辦?
(6)如何定量1-20 g的蛋白質?
(7)為何要用等量之galactose及mannose混合當單糖標準溶液?
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◆ From: 140.112.8.71