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http://www.cdc.gov.tw/sars/4國內SARS相關資訊/SARS實驗室診斷方法之使用.htm SARS實驗室診斷方法之使用 Update:2003/05/02 ------------------------------------------------------------------   世界衛生組織,2003年5月2日 +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ 檢驗結果判讀之建議 SARS檢驗陽性 a) SARS病毒PCR確認陽性 - 至少2種不同的臨床檢體(例如鼻咽檢體及糞便);或 - 同一種臨床檢體,但是在病程中不同的二天或多日所採取(例如二次或二次以 上的鼻咽吸出液);或 - 使用原始臨床檢體,分別操作二種不同的試驗,或分別重複操作PCR b) 以酵素免疫分析法(ELISA)或免疫螢光分析法(IFA)檢驗血清抗體陽轉 (seroconversion) - 急性期血清抗體檢測陰性,恢復期血清抗體檢測陽性 - 同時檢測急性期及恢復期血清抗體,效價呈四倍以上上升 c) 病毒分離 - 自任何檢體以細胞培養分離SARS冠狀病毒,並以經認可的PCR方法確認 ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ PCR陽性之確認 - PCR的操作流程中,每一批檢體應包含適當的陰性及陽性對照,並產生預期的結果: *操作萃取核酸流程時加入一個陰性對照,另於操作PCR時加入一個水樣對照 *操作萃取核酸流程及PCR時各加入一個陽性對照 *抑制性對照(inhibition control)- 病人檢體加入弱陽性對照組以偵測抑制PCR 之物質 - 若得到陽性PCR結果,應以下列方法確認: s 使用原始檢體再重做一次; 或 s 同一個檢體在第二個實驗室再做一次 若能放大另一個基因區域將增加試驗的特異性 ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ 對進行SARS檢驗之實驗室的建議 應以國家為層級來認定參考實驗室。 PCR試驗 使用PCR檢測SARS的實驗室方法已有相當的經驗,不過仍應採取品質管制流程,並在國內 或WHO合作研究室中找到合作實驗室,以交叉確認其陽性結果。 操作具SARS特異性PCR試驗的實驗室必須採取嚴格的條件來確認陽性結果,特別是在低發 生率的地區,其陽性之預期值應該較低。 SARS的PCR試劑組已製成商品,包括內部對照組(internal controls)。PCR引子及流程 已經發表在期刊上,各實驗室均可採行。陽性對照RNA可向德國漢堡Bernhard-Nocht研究 院索取。 SARS的PCR試驗其敏感度係視檢體種類及其在病程中取得的時機而定,真正的SARS病例可 能會在PCR檢測中呈陰性(偽陰性結果)。如果能採取多個檢體,或採取來自身體不同部 位的檢體進行檢測,敏感度將可增高。 若技術性流程能遵循品管指引,SARS的PCR試驗有非常高的特異性。技術上的問題(例如 實驗室污染)將造成偽陽性的結果,所以每個陽性的PCR試驗均應再做確認。 抗體試驗 酵素免疫分析法(ELISA)或免疫螢光分析法(IFA)試驗正由研究級實驗室研發中。 因為SARS是一種新的人類疾病,所以在從未暴露於該病毒的群體中並不會發現SARS冠狀 病毒的抗體。 同時檢測急性期及恢復期血清,抗體效價上升是非常具特異性的。 -- 朝もやに零れた光 永遠の夜に終わりを告げて 君は今 震えるまぶたを開き擴がる夜明けの庭園で 貴女と共に... 微かな陽差しに佇む君に 僕が差し出した白い花を その指に觸れて胸に抱くとき つぼみの花は開く -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.csie.ntu.edu.tw) ◆ From: 140.112.221.19