[求救] 腦部組織TUNEL

[cydin29 (Anne)]

這學期開始做組織切片的TUNEL
可是我每一次染的時候
TUNEL會成功地上去
但是DAPI就無法
會變成http://ppt.cc/xAtw
這個樣子

我的實驗步驟是
切片脫蠟後，泡二次水兩次，五分鐘
接著先使用Proteinase K打洞(20ug/ml) 30-60min，泡PBS 2次，5min
再來0.1%sodium citrate 8min，泡PBS 2次，5min
然後加入blocking buffer 1hr ，泡PBS 2次，5min
最後加入TUNEL 1hr(避光)，泡PBS 2次 5min
然後DAPI 500X 15min，PBS wash 2次 5min
最後進入暗房拍照

整個步驟中
都很小心謹慎
可是我的DAPI最後都會變這樣
不知道是否是哪裡出問題了
請高手們指點 THX

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→ apinpin:請問是買哪一跳TUNEL KIT
→ apinpin:哪一套 KIT
→ cydin29:Roche的
推 chuenwon:話說DAPI有那種含在封片膠裡的
→ cydin29:囧...我也用過DAPI封片膠，出來是一樣的結果~~~
→ angioadsc:拍照軟體設定與focus都ok？
→ cydin29:恩恩~都ok