[求救] [IHC]脫水步驟中的甲醇為何不會傷害抗原

[kuochuwon (黑輪桑~ YO)]

各位前輩們好，我是新手上路的碩一新生

最近再做IHC(immunohistochemistry)相關的實驗

老師考我一個問題，IHC步驟中的脫水（dehydration）會不會

破壞(或是使變性)細胞中的蛋白質或某些抗原，我知道答案應該是不會

不然我們做IHC實驗就不會用methanol來脫水了

但我google了很久，都找不到相關資料(只有說可以放心使用methanol來脫水)

到底為什麼methanol不會害蛋白質等物質變性呢?

ps: 我們所操作的model是斑馬魚,目的是要標記體內的huC/D蛋白

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推 milkpa:從IHC的原理去找答案
推 d200190:應該是會吧，只是antibody挑可以抓denatured protein的
→ d200190:http://ppt.cc/VMwm
→ kuochuwon:感謝1F和2F連結，回去後仔細讀看看
→ kuochuwon:找到答案了,但和所給的連結沒什麼關係... 重點是IHC步驟
→ kuochuwon:中做的PFA fixation就有避免甲醇使蛋白變性的效果
→ d200190:連結就有提PFA fixation可能造成變性啦...已經變性當然就
→ d200190:不怕methanol了
→ kuochuwon:沒想到你回了XD
→ kuochuwon:有點不懂,PFA應該不會造成變性吧?連結失效了所以我沒辦
→ kuochuwon:法再次看,你說PFA造成變性 ,那要binding的抗體不就無法
→ kuochuwon:結合上去了?