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大家好,目前我的實驗內容是培養THP-1這株細胞,然後分裝至6-well中,加PMA讓 它貼在well上再進行後續實驗。 可是這段時間以來不知道為什麼,細胞貼的狀況非常慘不忍睹,幾乎沒有貼。 我試著調整過,包括提高PMA濃度至100ng/ml(每個well有2ml)、多放一天(48hr→72hr) 等,但狀況都很不穩定,有時貼有時沒貼。 問過實驗室的學長姊,PMA應該沒有過期的問題,平時都-20保存也不會壞;操作時cell濃度 也和學姊指導時一樣,也有盡量mix well(左左右右前前後後晃了n次)。 有沒有細胞欺負新人,有學姊在旁邊鎮就很乖,學姊離開後就不聽話的八卦。Orz -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.127.197 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1404183184.A.288.html
KittyGod:先放上學姊的圖 07/01 11:28
untilnow:先放上學姊的圖 07/01 11:40
xxtomnyxx:在 incubator 放上學姐的照片,讓細胞覺得學姊在盯它! 07/01 12:44
roy047:incubator CO2那些應該都正常吧? 07/01 14:39
wolfling22:QB很正常,CO2濃度也都穩定,因為是公用的不會去調@@ 07/01 14:54
duriamon:問題主要應該是在PMA,PMA很容易降解,一定要保存在DMSO中 07/01 18:24
duriamon:而且PMA不能反覆冷凍解凍,最好分裝成一次用完的量 07/01 18:26
duriamon:詳情請上網去看Sigma的DataSheet以及它提供的paper 07/01 18:27
apple23418:這株不是懸浮細胞嗎? 07/04 14:59
skyofsilver:回樓上,他有加PMA刺激喔~ 07/04 23:38
alex53001:沒看到PMA之前跟APPLE有一樣疑問 07/07 19:53