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請問各位有鑄大片膠 (SDS PAGE) 的先進 小弟跑的是 DGGE 鑄膠時也確認沒氣泡 預混液也有預先離心讓氣泡不見 但是一旦放進 buffer 裡面預跑 5~60度 泡一泡就發現會有大顆氣泡產生 還有遇過整個開花像蚯蚓狀的花紋 這樣的狀況是因為 漏膠? (這次是鑄垂直膠 因為用水試的時候發現有漏一點 有另外用長尾夾幫助固定 後來就ok 不過真正鑄膠的時候還是有漏一點) 或者玻璃沒洗乾淨呢? 還是有其他問題 比方說.... acrylamide 等等的預混液過濾的不夠乾淨 顆粒太大 degas 不夠久?之類的 APS & temed 是沒有在過濾的吧 冏rz -- 原po 是孤僻兼自我感覺良好的 胖子 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.69.130 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1405500264.A.7E4.html
as862437:窘! 我們LAB做都沒有degas這步驟,會不會是在跑電泳時 07/16 22:19
as862437:膠片滑下拉扯的呢? 我們的玻璃也都感覺白白的洗不掉 07/16 22:19
as862437:有洗乾淨但是也不算是完全透亮的玻璃,正常可以跑 07/16 22:20
kakaman:做過2D大片膠,沒degas,頂多注膠時有敲擊桌面,使氣泡上浮 07/17 12:48
Lowrider:我以前做2D 也不用 但是 DGGE 大概因為有加尿素 07/17 19:58
Lowrider:怕溶解不完全 所以還多了過濾跟 degas... 07/17 19:59
Lowrider:目前是要把預混液 degas後再試 07/17 19:59
dehydrogenas:玻璃沒洗乾淨 APS不新鮮 07/22 14:45
Lowrider:昨天晚上跑看起來還ok 早上來就大開花 快昏倒了 XD 07/25 11:10
Lowrider:洗玻璃我都有洗到 嚕出聲音 然後用酒精擦阿~~orz 07/25 11:12
Lowrider:莫非是 APS 太古老 @@? 2006買的 07/25 11:13