作者Oh507P504 (劍3 ing)
看板Biotech
標題[求救] DNase處理的有無
時間Thu Jul 24 15:40:50 2014
請問一下
用Trizol抽完RNA後 在轉cDNA之前 一定要加DNase嗎?
因為我在chloroform分層後取上清液時都會留一段不要取
若是沒有DNase treatment的話 代表後續的qPCR實驗的結果都不可信嗎?
(Tm值單一 跑膠single band 但primer設計沒有特別注意有無跨intron)
--很不想重做的菸酒生--
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→ a90648:你轉cDNA時做一組沒有RT enzyme的control 跟著跑Q 07/24 16:08
→ a90648:從結果就可以知道可不可信了 07/24 16:08
→ Oh507P504:好窩 感謝 07/24 16:35
→ mzac1b:我的經驗是genomic DNA 影響 若是plasmid transfection 07/27 15:19
→ mzac1b:不處理DNase 就很容易p 到大量plasmid 07/27 15:19
→ mzac1b:genomic DNA 影響不大 但plasmid transfection 影響很大 07/27 17:47
→ mzac1b:嚴謹起見最好要做 07/27 17:47