Re: [問題] 這樣E-coli有受到污染嗎？

[huangsw (Orz)]

※ 引述《physics11 (11號)》之銘言：
: 【問題】：這兩個月來好幾次做實驗
: 塗完盤後E coli的菌都長這樣
: http://i.imgur.com/4tDXz49.jpg
: （圖中的菌種已經序列稀釋到10^-7次方了）
: 這個e coli真的是e coli嗎？
: 【問題起因】：
: 去年11月做實驗還很正常，但12月開始就有幾盤的菌落數不出來（暈開成這樣根本沒辦法數）
: 目前嘗試改進手法、
: 用去年七月繼代的菌來塗盤，
: 也都是得到類似的結果，
: 甚至稀釋到-8次方也是有同樣的現象
: 【個人看法】：
: 老實說，這根本不是我印象中e coli的morphology，
: 雖然在research gate上有人說這很正常，學長也跟我我這只是e coli長太大了要我再稀釋，但是都稀釋到-8次方了也數不出來，我打從心底覺得一直稀釋也不是解決的辦法，故上來請教各位先進
: 【參考資料/連結】：無

先問幾個基礎問題, 看起來你是自己配的agar plate,

1.你可以試著把plate直接丟去培養看看是否會長菌嗎？

2.你的細菌濃度是怎麼訂出來的？600nm Absorbance?
你是基於McFarland standard的基礎去做實驗嗎？

3.你序列稀釋有換tip嗎？ tip是否只插入液面下方一點點 還是整支插進去broth內？

以上可以可以給你一些方向參考一下

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 27.96.240.46 (臺灣)
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biology/M.1582032293.A.34F.html
推 physics11: 不好意思，小弟近日業務繁忙，現在才看到這篇回文
→ physics11: 1.單純丟plate不會長東西，無論是在hood還是在incubato
→ physics11: r都不會有這樣的現象
→ physics11: 2.用plate count的方式，稀釋後塗盤數菌落，至於大大提
→ physics11: 及的McFarland我們沒有做這些
→ physics11: 3.序列稀釋都有換tip
→ physics11: 我每次都是吸取液面下一點而已沒有整支伸進去（我們的p
→ physics11: ipette會跟tube卡住）
→ physics11: 但是吸取前都會vortex 15秒
推 Ice9: 養幾小時？
推 physics11: 回樓上大大，養24小時
推 physics11: 這是序列稀釋6次方的結果http://i.imgur.com/UfCvLGm.j
→ physics11: pg
→ physics11: 已經放棄希望了
→ physics11: http://i.imgur.com/j1EbSfo.jpg
推 Ice9: 養太久
→ Ianthegood: 這是transformation嗎? 然後沒有在養整天的啦你在種
→ Ianthegood: 菜逆 16小時以內要收
→ physics11: 回覆樓上大大，可能真的是養太久了，我會試試看在16小
→ physics11: 時內操作完，但是之前放24小時沒有出現這樣的情況
→ physics11: 然後這不是transformation
推 Ianthegood: 不是transformation是什麼？劃glycetol stock嗎?那你
→ Ianthegood: 怎麼會不劃象限還用塗的難怪長成這樣啊