作者stone1105 (ㄝ..)
看板Biotech
標題[求救] 用DCF DA染ROS
時間Mon Jan 12 12:54:19 2015
各位先進大家好
我最近在做DCFDA染色的方式來偵測ROS的表現量
大致上的過程
1.種細胞在96well(貼的細胞)
2.兩天後滿,然後做加藥處理或其他
3.時間到後,用PBS wash。然後配置 20uM的DCFDA在2%的PBS裡
並每格加100ul。
4.45分鐘後,吸掉DCFDA,然後用PBS wash 1次
5.用螢光儀去讀盤
可是發現同一次實驗3重複的情況下,數值跳動很大
3次不同實驗結果也都不太一樣..........
用儀光顯微鏡去看會發現細胞的綠光會越來越強,冏
到底這種實驗該如何做會比較穩定呢??
先感謝各位的幫忙
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.25.95.236
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1421038461.A.3BB.html
→ fatstan: flow cytometry?? 01/12 17:00
推 as862437: 要不要先做看染多久會讓線達到飽和?應該就不會一直跳動 01/13 01:13
推 p610087924: 可將一個實驗組改加NAC做陽性對照組試試看 01/20 08:06