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小弟最近在養脂肪細胞 但是覺得養不太好 分化的時候總是會有幾個well的細胞有開始脫落的現象 想請問板上有沒有 有經驗的可以分享一些在誘導分化的時候的小撇步 可以盡量減少這個情況的發生 謝謝大家了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.79.120 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1421134099.A.017.html
yuasa: Gelatin coating your plates 01/13 19:49
zoe77101y: 分化的medium會使細胞比較不貼,建議種多一點看看! 01/14 08:26
ararthur: 代數問題 可以試著全部都不加antibiotics 我的經驗是能 01/15 14:17
ararthur: 稍微幫助 但也應該要準備買新的細胞了 3T3L1是有限的 01/15 14:18
a14743535: 代數大概在多少以內的比較適合呢? 01/15 15:33
ararthur: 這很難講 現在從ATCC或BCRC買到的都是unknown 但基本上 01/20 16:01
ararthur: 他們手上會出貨的都還是有分化能力 就我經驗 BCRC去年買 01/20 16:02
ararthur: 的 好像從PU+6開始 我用到PU+12左右就快撐不住了 如果有 01/20 16:03
ararthur: 可仰賴的實驗室能分享年輕一點的細胞或許能要看看 01/20 16:03
ararthur: subculture請用1xPBS wash兩次 0.5x trypsinize 1min 01/20 16:05
ararthur: 70%前一定要subculture 並且不能太稀 頂多1:4-1:6 01/20 16:06
ararthur: 吸differention medium時 不要吸太乾淨 也離細胞遠一點 01/20 16:07
ararthur: 6-well plate是我目前的極限 以前都可以用12-well輕鬆做 01/20 16:08
ararthur: 如果細胞邊緣一直容易脫落 enlarge scale是可行辦法 01/20 16:10
ararthur: 我目前能想到的就是這樣了 在這個3T3-L1末法時代走過4年 01/20 16:10
ararthur: 不得不想辦法存活啊 01/20 16:11