[求救] 最近細胞狀況不好

[peterjfs (幾家歡樂幾家愁)]

各位板上的生科前輩

小弟最近養細胞遇到一些問題~想請問各位大大是否遇過

過年前將自己正在養的細胞株 SW1353 凍起來

代數大概是p60

過完年後回實驗室~~~就開始解凍細胞作實驗

狀況是這樣的：

凍細胞使用5% DMSO 跟 95%的FBS

解凍時直接將細胞置於37度C水浴，解凍後將細胞直接加入medium中

待細胞貼盤後(大約6~8小時)將medium吸除，給予10% FBS新鮮的medium

第二天觀察細胞時，細胞狀況都不錯

第三天觀察細胞時，細胞全都漂起來.....

medium沒有汙染的狀況，可是細胞都漂起來，試過好多隻細胞也都是這種情形

想請問各位前輩們是否有遇過相同情形，不知道該如何解決

目前已排除PBS Tryple medium汙染 (因為小弟全換過新的了)

最近都有看細胞恐懼症. ....細胞養了5年第一次碰到這種情形>"<


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→ roy047: incubator是好的嗎?@@
→ peterjfs: 恩~~~只有我有問題QQ
→ zoe77101y: 建議可以解凍完
→ zoe77101y: 離心細胞，馬上去除DMSO試看看
→ zoe77101y: 另外，6-8小時後，有觀察到懸浮物有多嗎？？
→ lail: 先請別人幫你解，確定活了再給你養
→ homeshawn: 其實。。我懷疑你當初凍細胞有汙染。。。。
→ homeshawn: 可以染個hoechst看看 @___@
推 shinuy: 覺得凍細胞前細胞已有問題+1