小弟目前在做sirt1酵素的純化
此酵素是從addgene公司買來的
之後養在BL21 E coli細菌後
經過一般步驟
最後用his tag purification resin進行純化
最後做SDS跑膠時發現我的major band在110kda以上
不過addgene買來的sirt1上面寫大概在81kda
不知道是哪裡出問題

請高手幫忙><

http://i.imgur.com/8WZIInx.jpg


-----
Sent from JPTT on my HTC Butterfly.

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 101.14.19.58
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1427248392.A.FDF.html
→ Ianthegood: 有addgene的資料嗎
※ 編輯: dennissnake (101.14.19.58), 03/25/2015 11:03:11
→ blence: sirt1各家Ab染出來的都是110kda附近,81kda是seq predict
→ dennissnake: http://i.imgur.com/aWOWPBZ.jpg
→ dennissnake: 這是addgene的sirt1
→ dennissnake: 網址是 https://www.addgene.org/13735/
→ dennissnake: 分子量差這麼多是因為他除了his tag外還有其他tag嗎!
→ dennissnake: ??
→ dennissnake: 差30kda感覺頗大QQ
→ GG810424: http://static.enzolifesciences.com/fileadmin/files/i
→ GG810424: mage/BML-SA427_WB.jpg
→ blence: 都說FL就110了怎會去懷疑tag，這種情況常有，少見多怪
→ dennissnake: FL是什麼意思阿?
→ e104582001: full length
→ dennissnake: 那請問有人看過sirt1跑膠結果分子量是110的相關paper
→ dennissnake: 嗎 我也覺得我做的是對的 想拿出證據給老師瞧瞧XD