作者gto33456789 (太人生了)
看板Biotech
標題[求救] pET24a與pET28a的差別
時間Wed Apr 29 16:07:12 2015
實驗作細菌表現病毒蛋白
我製作了蛋白質表現的載體pET24a和28a
在同樣IPTG濃度以及時間下，我的蛋白質都可以被表現出來
但pET40b卻沒有表現
查了一下書，發現28a在N和C端都有histag
而24a只有N端有，其它的差異我看不懂
T7-tag一個有一個沒有
請問以我的實驗需求(拿來打兔子作抗體)
這兩個載體有什麼差異嗎?
而為什麼pET40b卻又表現不出來?
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推 pen88:以前覺得 鬼塚22歲還是處男很好笑 現在我笑不出來 10/19 01:47
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→ huuban: pET40b有DsbC fusion protein 04/29 18:18
→ blence: 28a只有N端His,兩者也都有T7-tag,查書有? 還是pET manual? 04/29 23:43
→ huuban: 28a是兩端都有His吧 04/30 01:01
推 eric1210: 28a兩端都有his ，his可用來純化 ，你要打兔子蛋白要大 05/01 15:19
→ eric1210: 量表現，所以必需留一個 05/01 15:19
推 eric1210: 40b我沒用過 ，你有沒有確認好primer設計？若接上去產 05/01 15:24
→ eric1210: 生shift就不會表現了 05/01 15:24
→ blence: 我想說的是28b才算有C端His,28a的必須修正,因inframe不對 05/01 15:28