[求救] MTT數值怪異

[cheug0653 (Tiny Orbit)]

http://www.trevigen.com/docs/protocol_4890-XX-K.pdf


我是按照這個Protocol做實驗的

順序一模一樣 都沒有少做(但沒寫在上面的我也沒多做)

(如果懷疑我可能有認知錯的地方也可以提出 謝謝)

唯一不同的是給我的detergent reagent不是Cat# 4890-25-02

是4892-010-02 我想問是不是廠商給我的藥有錯 如不是請繼續往下看

兩次實驗的結果 blank的吸光值都在0.35上下

control大都0.70上下

問題是藥物的濃度愈高 竟然吸光值是愈高的

第二次我多做了細胞數的不同

3x10^4/well的(100% 70% 50% 30% 10%)細胞數的control吸光值

並沒有發現顯著差異

趨勢也和第一次實驗一樣 藥濃度愈高 吸光值愈高(0.7一路增加到1.3)

目前我無法處理數據 請各位資深的朋友多幫忙指正囉

感謝

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→ zoe77101y: 時間呢？放多久！！
→ cheug0653: 貼24小 作用24小 mtt2.5小 detergent 2.5小 目前叫廠商
→ cheug0653: 換藥 因為應該是送錯藥了 我當初問還說沒問題= =
→ blence: 看用詞有點不習慣&如果瞭解MTT,換之前加DMSO就先看結果了
推 DrPiGu: 你們的藥是不是在650也有吸光值? 先掃一次看看
→ cheug0653: 原本Protocol中的那支藥是SDS 不是DMSO喔
→ cheug0653: 650是吧 我會試看看 謝謝
→ cheug0653: 我是新手 只照著Protocol做 因為沒有人在旁指導QQ
推 qiet: 肉眼看結晶就知道結果了, 跟用什麼solvent應該比較無關
→ qiet: 波長只要是在說明書範圍內應該都沒問題
推 qiet: 不同細胞數那邊的結果是得不到預期差異的意思?
推 qiet: 也是有可能使用的MTT不適合你用的細胞株...
→ qiet: 或藥物可能會影響到去氫酶酵素的活性 ~"~
→ qiet: 但blank(medium only?)那麼高藥可能怪怪的, 換了做一次就知