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小弟目前是茫然的碩一生,由於實驗的設計,我將來會一直做到Immunocytochemistry, 用confocal microscopy來看細胞內蛋白質的分布情形,同時也要做Western blotting, 所以我把蓋玻片消毒之後放在10公分的plate上面,種細胞(adhere),養滿後做treatment 然後蓋玻片取下來壓抗體,封片做confocal;Plate上剩下的收下來跑Western。 目前做了第一次,遇到一個小問題:蓋玻片好難取阿QAQ~~~ 我拿鑷子在那邊摳了半天才摳起來,感覺細胞都被我刮得亂七八糟了。 想請問大家有沒有甚麼特別的技巧可以將盤子上的蓋玻片輕鬆拿起來? 另外請問對於這樣的做法有沒有甚麼指教和建議呢? 謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.4.190 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1432536951.A.E84.html
milkpa: 放邊邊或用24-well plate種 05/25 15:13
Ice9: 用針挑啊。怕它移動的話,用tip或針擋住另一邊。 05/25 17:16
Ice9: 我是習慣在有 medium 的情況下挑起,比較不會因為水的內聚力 05/25 17:17
Ice9: 而難挑。而且,挑起來後它回降速度比較慢,有助於等鑷子來夾 05/25 17:18
yoyowan303: 用1 cc tip去用會蠻好用的 05/25 17:52
roy047: 用針頭很好把玻片挑到立起來 05/25 21:12
tynse71864: 我最近也在做ICC 建議是吸乾buffer前挑 05/25 21:43
tynse71864: 還有邊邊的細胞刮花沒差 反正中間還一大片能看 05/25 21:44
tynse71864: 另外要挑蓋玻片(上面沒有細胞!)到plate內有個小撇步 05/25 21:45
tynse71864: 用suction吸起來 到well中再放 05/25 21:47
tynse71864: 是說比較建議種在2個6well 一個ICC 一個收western 05/25 21:48
tynse71864: 畢竟有slide在上面漂,可能會影響底下細胞的生長 05/25 21:51
untilnow: 拿兩個空盤加酒精, 右邊放50片玻片, 早上由右移左盤 05/26 11:51
untilnow: 晚上回去前移回去, 練習一個禮拜就可以了 05/26 11:52
flourance: 有吸蓋玻片專用的小工具~就像吸馬桶那樣縮小到筆這麼大 05/26 16:51
chaunen: 把針頭尖端弄成L形 很好挖阿 05/27 06:20
感謝各位的建議, 我會先用針在裝水的空盤上練習挑挑看,實戰的時候應該會比較上手。 再次感謝。 ※ 編輯: FYT0429 (140.112.4.190), 05/27/2015 16:30:09