[求救] HPLC初學 peptide流動相的選擇

[bluebluewind (藍風)]

大家好

我現在是HPLC的初學者

最近遇到要用HPLC來分析peptide

之前問過生技公司的業務

她建議我用甚麼溶peptide就用甚麼當流動相

所以目前我選用的流動相是PBS

想請教大家在分析peptide時都是選甚麼當流動相呢?

謝謝


--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.127.233.77
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1438325235.A.5FF.html
→ yuasa: 我不做peptide也不是HPLC高手，但我想應該不會有人選用PBS
→ yuasa: 要選也是用水 甲醇或acetonitrile之類的溶劑下去混梯度吧。
推 huangsw: 你要不要...先google一下HPLC的相關資訊阿  QQ
推 leptoneta: 你要不要先看看是用什麼管柱???
→ yuyumom: 蠻酷的 實驗室有學長姊可以教你嗎 或考慮修一下層析學
→ ryokoon: 用PBS你確定????管柱是哪支?
推 ryokoon: 去查一下相關paper必較好，有時業務講的信一半就好XD
推 rusly: 去查paper 搜尋LC-MS的看看 通常都是水相
推 HOHO0220: 問hplc儀器的技術專員
→ as77as77: 95% ACN 5% H2O 還有 100% H2O 跑gradient
→ as77as77: Column 應該都是用reverse phase 的column
推 Peetu: peptide如果分子大，一般不會用RP吧~
→ Peetu: 蛋白質一般都會使用size exclusion column
→ Peetu: MP就用水或是鹽類如phosphate之類的，可以算一下PI值
→ Peetu: 用PI值去找適當的MP~ 另外如果用ion exchange就要調一下pH
→ Peetu: PBS當mobile phase是可以的喔~ 做蛋白質很常用到阿!
→ Peetu: 會用ACN的一般都是RP column，分析peptide建議用分子篩
推 HPLC: PBS很常用...移動項要看column來決定  不是HPLC就是用ACN Me
→ HPLC: OH 跟水