[討論] 小鼠在 intrasplenic implantation 後死

[marugucci (Gucci)]

我過去做過好多次的 intrasplenic injection tumor cells
所以，技術上應該沒問題
但是
最近一次從LASCO進的 SCID mice 才發生這樣的現象
只要一打完，小鼠就顯得很虛弱....
不管保溫、心臟按摩....最後都回天乏術
我試了其他細胞株，也發生同樣的情形....一直猜不透原因??
我處理的條件如下:

tumor cells [2.0E+06/40 uL]
老鼠氣麻後，手術打開腹腔，於spleen 注入 40 uL
手術縫合...
手術過程含縫合約5~10分鐘
因為傷口都很小 [< 1 cm]
對於非經由spleen 的 orthotopic mice
約在下一隻小鼠手術完成後，都已經可以很活躍走動
然而 spleen injection mice 卻顯得失溫且無力...
我這一批 20 SCID mice 分成3次實驗做完，一半做orthotopic，一半做intrasplenic
結果 intrasplenic group 全數陣亡!!

不曉得有人是否有經驗，會是哪方面的問題? 免疫 shock ? 還是其他?

下周會再進一批老鼠，希望這個疑問得以解決...

謝謝賜教!

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→ enolam: 細胞有無污染?suspension用的pbs或matrigel有無確認無endo
→ enolam: toxin污染?或者你的癌細胞是有訓練過好幾次的特疏細胞株
→ marugucci: 目前已知細胞打入pancreas 沒問題，但打在spleen 就死
→ beingho: 有可能是 leaky，下次測一下Ig
→ evilest: 會不會是細胞流到靜脈，造成肺部或心臟栓塞…
→ evilest: 我做 liver orthotopic時，有的老鼠會大喘氣然後陣亡
→ evilest: 推測是推太猛，細胞沖到血循中，卡在肺臟，然後老鼠就GG
推 evilest: 另外，加matrigel打到肝膜上死亡率超高，原因不明