[討論] 請問trypsin可以拿到37度水浴槽warm嗎？

[aaaazzzz (找英文家教)]

請問trypsin可以拿到37度水浴槽warm嗎？
我先前的作法(幾乎本實驗室所有人的作法)，
會事先從冰箱把trypsin先擺在常溫5-20分鐘，
先開始繼代步驟，
加了trypsin之後，
會放在incubator 1-5分鐘，
用顯微鏡看有無把細胞打下來。

有時候趕時間，
trypsin可能常溫擺個1-2分鐘，
就開始繼代，
但會發現這時候的細胞就不容易打下來。

所以我想既然加入trypsin之後還要擺進去37度的incubator，
那是否可整罐trypsin直接放到37度水浴槽warm一下，
可節省時間，
但想到酵素放到37度，
會不會失去活性。
在此請教各位先進前輩的意見，
謝謝！

PS:有先爬文，看到一篇2006年的寫說他們的實驗室都會把trypsin放到水浴槽

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推 caesar0926: 我認為不要放置太久應該是可以，怕酵素自切。
→ caesar0926: 雖然我的方法都是同你第一個方法，在warm medium的時
→ caesar0926: trypsin放在室溫一起等。
→ caesar0926: 怕的話就盡量分裝吧??
→ blence: 我很討厭有人放水浴漕,用久了愈來愈沒效,都冰箱出來直接用
→ blence: 所以1X 0.05%對一般癌細胞2-5分鐘都可起來
→ blence: 10cm用0.7cc,不過應該算trypsin不多加,細胞就直接放進37度
推 leptoneta: 怕回溫太多次的話 分裝不就好了
→ aaaazzzz: 我實驗室有兩種方法,一種10cm給2cc的trypsin之後，從第
→ aaaazzzz: 一盤逐盤吸起來,再放到incubator。第二種10cm dish加入
→ aaaazzzz: 1cc trypsin後，直接放入incubator,之後再直接medium中
→ aaaazzzz: 和。謝謝c大與L大提供分裝的意見。
→ aaaazzzz: 所以大家進culture room直接把少量的trypsin warm，然後
→ aaaazzzz: 觀察細胞，觀察完開始做實驗，省掉等trypsin在室溫升溫
→ aaaazzzz: 的時間？
推 babebabe: 我們實驗室也都會分裝到15cc離心管跟medium一起拿去warm
→ babebabe: ,在用完之前都不會有切不動的情況發生
推 payton103075: 我們以往也都是分裝在15mL離心管 跟medium一同回溫
→ michaelhsien: 我們用50mL Trypsin都放37℃回溫，沒差啊!
→ michaelhsien: 有些同學忘記，放了幾個小時... 還是可以用XD
→ aaaazzzz: 了解，這樣可以減少trypsin放在室溫回溫的時間，謝謝！
推 kg9101266: 我以前跟某博學的時候他也都是和培養液一起回溫
→ kg9101266: 只有PBS是用冰的 說甚麼會讓細胞懸浮得較好...
推 LIAR: 我trypsin在10cm都用3ml耶？因為怕沒蓋到，1ml不會乾掉嗎？
→ aaaazzzz: 我用兩cc吸掉擺進去,好像還好,拍一下,細胞有飄浮的感覺
→ travelmat: 我跟過的lab都分裝後37回溫，聽說太頻繁會失活，但我沒
→ travelmat: 遇過
→ travelmat: 另外我沒遇過冰的任何液體直接加細胞耶，這樣不是會造
→ travelmat: 成stress嗎？
→ blence: 為什麼有需要多加trypsin再吸掉才放37度,何不少加就好
→ blence: 多數遇不到失活,是因為加多,加2X濃度,又分裝使用
→ blence: 我用完借別人常常放37度幾小時以上的,就需要加幾倍用量
→ blence: 如果沒遇到效率變差,請在少量的trypsin試試有無覺得差異
→ blence: 一般on-dish lyse 10cm用0.5cc就夠了,trypsin也不擔心覆蓋
→ blence: 之前好問兄提問medium最小體積,必竟太少體積生長會不穩,
→ blence: 但trypsin少加如果OK,也不用一手續把trypsin吸掉才放37度