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小弟最近在實驗設計遇到問題,特地上 來請教各位大大。 如果要用E.coli表現一個重組蛋白,讓它 在轉譯之後,兩兩互相作用才形dimer, 不知道有什麼好辦法? 小弟目前是有想在欲表現蛋白後面接 Leucine zipper,可是找不太到Leucine zipper的DNA序列。 不知道版上的大大有什麼好建議,看是 可以在後面接其他序列,或是什麼方法 可以取得LZ的DNA序列? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.243.19.238 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1442590527.A.860.html ※ 編輯: mountain8110 (111.243.19.238), 09/18/2015 23:41:21
Ice9: NCBI上找有leucine zipper (ZIP等)的基因,然後找相對應的序 09/19 08:24
Ice9: 列是什麼。NCBI->Gene->Nucleotide 09/19 08:24
mountain8110: 有上去找過了,可是我找到的都是全基因,還有intron 09/19 10:31
mountain8110: 在裡面,不過還是感謝 09/19 10:31
Ice9: 你没仔細找,或者打開的方式不對。我在首頁的下拉式選單中, 09/19 15:10
Ice9: 先選了Gene,再輸入 leucine zipper homo sapiens,就出現一 09/19 15:10
Ice9: 堆和有關的基因了。選了其中的BACH2(id:60468)和NRL(4901), 09/19 15:12
Ice9: 在Gene頁面右邊的ToC有NCBI Ref Seq,點下就會跳到Ref Seq。 09/19 15:13
Ice9: 以NRL為例,我點NM_0061773.1的mRNA序列,出現的頁面中再以 09/19 15:14
Ice9: 尋找leucine zipper關鍵字,就出現說明是690-775。 09/19 15:16
Ice9: 但是,如果你只是想要 dimerize protein,可以再找合適的 09/19 15:21
Ice9: interacting domain(s)。 09/19 15:25
mountain8110: 感謝大大 ,可以順便請叫一下 ,為什麼找到關於lueci 09/21 14:40
mountain8110: ne zipper的文獻都是十幾年前的 ,比較少最近的 。 09/21 14:40
mountain8110: 是因為在應用上有遇到什麼困難之類的嗎? 09/21 14:40
Ice9: 研究人員和農民差不多,可能是再研究下去也難有產出,因此就 09/21 20:04
Ice9: 轉換研究課題或轉換研究對象去了吧?! 09/21 20:05