[求救] trypsin 回溶流程

[rusly (因風飛過薔薇)]

各位好

今天突然發現實驗室裡面大家 回溶trypsin的方法很不一致XD

我們實驗室是在做蛋白質鑑定的 因此需要用trypsin把蛋白質切成胜肽


1)有的方法是 把trypsin從-20度取出，加buffer後放在冰裡靜置20~40分鐘再使用

2)有的方法是 把trypsin從-20度取出，加buffer後直接在室溫下放20分鐘後開始使用


請問~~ 上述這兩種方式有差很多嗎@@

後者會讓trypsin失去活性嗎? 還是其實兩者差異不大呢

請前輩們指教~~ 謝謝!!

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推 caesar0926: 多少會。個人覺得重複解凍比較傷，另外trypsin作用最
→ caesar0926: 好是在37度吧，室溫20分應該是還好。是說是解凍還是回
→ caesar0926: 溶??..
→ caesar0926: 結論是個人認為差異不大，但是硬要比2應該會傷一點。
→ caesar0926: 個人意見有錯請指正!謝謝
謝謝ceasar大的回覆!!! 上述的狀況是要把粉狀的trypsin加buffer成溶液的狀況
※ 編輯: rusly (140.122.136.115), 09/24/2015 12:09:29
推 icheee: 粉狀的 trypsin 我都存在4'C 耶…
推 joann88431: 其實....我都用手握住加溫....(不要被學長姐發現的話X
→ joann88431: D)
→ chvkimo: 本lab 粉也是存放在4度C,還是你家買的是-20保存?
→ chvkimo: 不的過我指的是cell culture用的
→ rusly: 我們是保存在-20度喔！