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是的本魯悲慘的研究生 研究的題目是做出一台PCR機器 跑完溫度循環 在監測SYBR Green的螢光 但目前卡在 檢體滴入我設計的卡匣 放到機器加熱後 檢體整個蒸發乾 也試過加入礦物油(mineral oil) 檢體20ul+10ul的礦物油 但依然還是蒸發殆盡 我查過文獻 礦物油、甘油、石蠟油 都有人使用來防止蒸發 這三種有什麼差異性嗎? 有沒有人可以提供一些建議 救救我這碩2.5的可憐延畢生 感謝萬分!!! 附上我的卡匣設計 : http://imgur.com/71E2IKm 以壓克力當基材 用雷射切割出圓孔 再使用雙面膠將 鋁箔紙黏住當成底部 檢體注入後 再透過雙面膠將 透明投影片黏住 使他整個密封 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.116.78.236 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1444879502.A.460.html
tsubasawolfy: 1. 上蓋有無加熱 2.密封氣密性如 10/15 11:43
1.上蓋無加熱 2.氣密性應該是還可以 因為我卡匣滴入檢體密封後 放了兩個禮拜以上 裡面的檢體都還在
blence: 礦物油是舊式機型會用到的,石蠟油我不知道 10/15 11:48
blence: 甘油在你檢體就內含,加入與水互容稀釋體積,更抑制酵素活性 10/15 11:50
※ 編輯: yoyokid (140.116.78.236), 10/15/2015 15:45:35
patricksky: 材料加熱過後 膨脹溢出? 10/15 20:51
patricksky: 先把有顏色液體裝入卡夾 丟到95度C熱水環境做檢測吧 10/15 20:52
patricksky: 檢查是否會液體溢出 10/15 20:52
huangsw: 熱漲冷縮的因素考慮進去沒? 感覺你上下的強度不夠... 10/15 22:12
amou0303: 基本上做qPCR的管子蓋子密合度要非常高,我認為是密合 10/15 23:47
amou0303: 度不夠才蒸發的。 10/15 23:47
Ice9: 你的雙面膠加碰到油之後加熱到接近100度C時會怎樣? 10/16 00:44
Ice9: 你的氣密性設定有放著加熱兩星期嗎? 10/16 00:45
Ice9: 還有反覆地昇降溫對於雙面膠的黏性有没有什麼影響? 10/16 00:45
Ice9: 個人覺得P大的建議很好用,有做過類似的檢測嗎? 10/16 00:50
Ice9: 你的設計似乎是不用微量管的。那污染問題要怎麼解決? 10/16 00:51
Ice9: 還是我誤會了?如果是我誤會,我會覺得微量管有問題。 10/16 00:53
Ice9: 另外有没有可能會是加熱太快,讓樣本衝出封鎖?XDD 10/16 00:56
雙面膠可耐熱到135度 我設計非微量管 是半徑2mm的圓 我覺得是我壓克力熱變形後使得密合度 變差甚至有縫隙
cain07: 密合度不夠~~上周有做狀況跟你一樣~~換上膜之後就解決了~ 10/19 02:27
請問可以分享一下你用什麼上膜嗎? 或是詳細分享你的專案做個討論 ※ 編輯: yoyokid (140.116.78.236), 10/20/2015 13:10:19
Ice9: 那雙面膠在碰到油的狀態下,加熱時會穩定嗎? 10/20 20:31
我有試過P大的方法 卡匣裡滴20ul墨水+10ul礦物油然後密封 分別丟在常溫水裡 與100度的水裡 都沒有溢出的現象 我覺得問題出在我加熱只有單面 導致有溫差 使得卡匣熱膨脹彎曲 破壞了我原本的密閉性 ※ 編輯: yoyokid (140.116.78.236), 10/21/2015 15:00:44