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大家好,我目前想要將K. Pneumonia進行破菌,並再利用IP法純化出在periplasmic space的beta-lactmase蛋白。目前是卡在破菌這個步驟。 過去的文獻顯示,針對GRAM(-)菌,若是要純化periplasmic space中的蛋白通常是 利用Lysozyme-osmotic shock method。但是我現在的菌種是K. Pneumonia, 含有莢膜,怕只利用這種方法無法順利破菌。我搜尋了文獻是有看到利用 Lysozyme搭配sonication的方法來進行破菌,但是這種方法會將內 膜也打破。不知道版友是否有針對含莢膜的菌種進行過破菌,並且是純化其中的 periplasmic space蛋白的經驗可以供參考,謝謝。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 203.65.71.253 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1445498994.A.CC4.html
ifam: 記得以前有學長試過超音波破箘的方法 10/25 21:23
Peetu: 法式破菌呢? 10/28 00:38
kg9101266: 法式破菌和超音波破菌都會把菌體整個打破吧... 10/29 20:52
Peetu: 全部打破再用IP純化出來不行嗎? 10/30 10:11