推 DrPiGu: 理論板數.. 11/01 00:25
是否能詳細說明呢?
※ 編輯: Peetu (114.35.44.89), 11/03/2015 00:51:27
今天跑HPLC時，打了標準品 (天然活性物的標準品)
發現更改分析條件，例如MP比例、溫度，都不太會影響積分面積的數值
只有更改流速時，積分面積會變動 (所有條件下都不更動，只有調流速)
例如原本流速為1.0，分析出來的數值是10000
變更為0.5，分析出來的數值就會變成20000
想討論一下這是什麼原因造成的呢?
我的想法是:
一般來說純度高的單一sample打到column後，就會集中在一點
按照與column和MP的分配系數，來決定RT，一起沖出column後，由偵測器讀出數值
k = stationary phase/mobile phase，因此降低流速只是影響k值變小而已，提高RT
但應該不會影響偵測器的判讀，因為sample是一起被沖出column
因為column容積是相同的，不會因為流速提高，
導致column內體積增加，進而稀釋掉sample吧?
HPLC: waters
column: RP C18 5uM
MP: ACN/Formic acid/water
detector: PDA
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