[求救] Roche Taqman qPCR 請教

[ararthur ()]

我想請問Roche Taqman probe實驗的問題，

跑出來的圖 http://imgur.com/a/irQaZ

三個圖分別是不同的3個gene target x 同一組sample+一個no template control

其中一個圖有Ct值 但看起來與curve的對照實在不很相同



請問這樣的Amplification curve是合理的嗎？

特別是有些sample peak最高值不是很高，

若不可信則可能的原因是sample太舊?probe過期?或該如何調整呢？



Sample是小鼠tissue，但放得有點久才抽RNA，

Probe也比較舊，不過Fig3的圖看起來最穩，probe卻是最老的(2007年買)

No template control 通常是趴得最低的那一條。


謝謝。

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→ Fongshin: 你的圖好妙，上面都是抖抖的線
→ Fongshin: 以前我做小鼠RNA tissue不會放超過一週才抽，probe 也
→ Fongshin: 有放很久的拿來測，是沒問題；現在在做大鼠的RNA，別的
→ Fongshin: 實驗室有給我們RNAlater試劑，可以加在組織裡面，就能
→ Fongshin: 比較長時間保存，你的圖的問題，因為我還很外行，你可以
→ Fongshin: 問tagman的業務(ABI?)或是問你使用RNA extraction kit
→ Fongshin: 的業務(若為Qiagen 找凱杰公司）
→ ararthur: 總算有人回復了 感激(握) 我也不知道他們在抖哪齣的 但
→ ararthur: 手頭上的sample也是Lab其他實驗留下來的 另外 我沒有拍
→ ararthur: 好 最抖的那張圖 螢光強度max大概只落在0.2而已 相對弱
→ ararthur: 我也問了Roche業務(這是Roche lc480的qPCR) 等不到回應
→ ararthur: 阿阿阿
→ Fongshin: 打電話催問一下