[方法] 冷凍切片IF要Heat-induced retrieval嘛？

[autopass (how to give name)]

我最近在染pERK in mouse brain tissue
(這隻抗體，確定在paraffin section染IHC，可以染)

slides直接染，沒訊號，
試了proteinase K, EDTA，retrieval都染不出來，
後來查到了一篇2015年的journal of neuroscience
它是用citrate buffer, pH 6.0, for 10 min
可是我一般做paraffin section的都會把buffer加熱到滾
在放下去煮20分鐘，
請問那cryosection要嘛？
看版上以前的討論，過強的retrieval會造成false positive嘛？
謝謝回答...

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.220.139
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1452004014.A.411.html
→ osla30: 抗體比例濃一點試試呢？
推 Realthugz: citrate 跟前面retrieval有啥不同？
推 Realthugz: 烘片時間和fixation時間會不會影響這蛋白
推 birdinucr: 我常染鼠腦冷凍切片的pERK，這抗體不用retrieval
→ birdinucr: Slides直接染本來變因就大，用free floating吧
→ autopass: 了解，感謝各位，我試試