作者saviora (颶風之翼)
看板Biotech
標題Re: [求救] NK cell cytotoxicity公式
時間Thu Feb 4 15:09:32 2016
※ 引述《satan317 (貞夫)》之銘言：
: 小弟在一篇論文找到的細胞毒殺能力的計算公式:
: (兩種細胞混和的OD值-effector cells的OD-target cells的OD)
: /(target cell lysate的OD-target cells的OD)×100%
: 想請問一下
: 1.假如兩者混和的細胞數是各50顆，那測effector cells的well要加幾顆effector cells
: 2.兩種細胞混和的OD值-effector cells的OD-target cells的OD不是應該變負數嗎?
: 這樣的話毒殺能力不就也是負的?
: 3.測target cell lysate的OD的用意是?不能直接以target cells的OD作為分母嗎?
: 拜託各位了，謝謝
1.首先要知道吸光值要測的是什麼
既然這是細胞毒殺能力測試 就是要知道標靶細胞死多少
標靶細胞死了後細胞內的東西會釋放出來 OD值測的就是這個
2.你在操作細胞實驗的時候 細胞難免會受損破裂
所以才要將實驗組(兩種細胞混和的OD值)去扣除兩種細胞的背景值
所以當你使用各五十顆細胞混合做實驗時 當然是扣除五十顆標靶細胞以及五十顆NK
的吸光值
3.使用target cell lysate是因為他是全部溶解 把他當作100%
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推 satan317: 首先感謝回答 不過我還是不太懂 我忘記說這篇論文是用 02/04 15:43
→ satan317: Alamar Blue去測的 所以我才會說扣除兩種細胞背景值是負 02/04 15:44
→ satan317: 數 也就是說這公式本來推導是用破損細胞OD值來推倒的意 02/04 15:45
→ satan317: 思囉? 所以用在這個實驗裡分子分母負負得正這樣? 02/04 15:45
→ satan317: 也就是說不嚴謹的實驗的話 cell lysate可以用空白對照取 02/04 15:47
→ satan317: 代? 02/04 15:47
→ a90648: Alamar Blue測的是活細胞喔!!你可以去查一下他的原理 02/04 17:51
→ a90648: 建議把原Paper title附上，這樣資訊才夠做判斷 02/04 17:53
→ a90648: 這邊判斷應該是因為effector cells會殺死target cells 02/04 17:54
→ a90648: 所以分子照樣減會是負數，分母那個lysate應該就是背景值 02/04 17:55
→ a90648: 所以剪完也是負數，負負得正 02/04 17:55
→ saviora: 如果是那個染劑是我搞錯 SORRY 02/04 18:39
推 satan317: 我大概懂了 感謝回答 02/05 10:39