作者ym951118 (Sakicho)
看板Biotech
標題[求救] DNA跑膠
時間Tue Feb 23 21:29:09 2016
最近抽dna跑pcr
產物跑膠結果都拖一長條
http://i.imgur.com/hkorbcc.jpg
同DNA
Load 4.6.8.10.11.12
27F 長度20bp Tm50.8 GC:47.5%
1492 R 長度22bp Tm52.0 GC41.5%
primer濃度 10uM
PCR條件
95度10分鐘
95度1分鐘, 梯度（54-60）1分鐘, 72度1分鐘 循環34次
72度10分鐘延長
想問一下如果primer沒夾到會這樣嗎？
還是其實是DNA的問題
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 110.28.224.15
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1456234151.A.AEC.html
→ a90648: 沒P出東西 02/23 21:37
→ xxtomnyxx: DNA 加太多吧.... 02/24 00:27
→ supray: 同上 拖一條的是你input的gDNA下太多了 02/24 08:16
→ ym951118: 我總體積20ul，DNA加1ul，所以我該降低dna 的量嗎？ 02/24 08:57
→ darkdoor: 你的Tm最高也只有52度,梯度最起碼也要從50度開始拉吧 02/24 09:09
→ Bows: dna 是要看重量加多少，體積會被你的濃度影響 02/24 10:12
→ elite2: 做分生實驗思維只停在體積，而沒有濃度觀念其實很危險阿 02/24 12:11
→ supray: DNA過濃可以稀釋後再取 02/24 17:43
→ ym951118: 好，謝謝各位指教，dna濃度確實挺高的，我會再做調整 02/24 18:51