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大家好,有個關於 WB 顯影的問題想請教。我們現在是用 Bio-Rad 的 Image Lab 看 WB 的 bands,但是有時候會出現下圖這樣不均勻的情況,試過用保鮮膜包住 membrane 讓顯 影劑均勻點,但是效果沒很好,有時還是會出現這樣不均勻的情況,不知道版上的各位有 沒有這種困擾,都是怎麼解決呢?感謝。 https://imgur.com/WYeuQQ0.jpg
-- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 128.189.211.60 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1456782495.A.43C.html ※ 編輯: ad1980 (128.189.211.60), 03/01/2016 06:02:40
blence: 你認為哪些位置是不均勻? 03/01 09:30
tynse71864: 感覺蠻均勻的阿? 03/01 21:24
ad1980: 藍線中間比較亮 http://i.imgur.com/1nfFuAL.jpg 03/02 12:30
ad1980: 比較亮的地方 bands 會顯得比較淡,這樣不知道是因為量比 03/02 12:34
ad1980: 較少,還是那塊比較亮所以看起來比較少。@@ 03/02 12:34
qiet: 這應該還好吧, 也許blocking時間久一點有辦法更好 03/02 20:59
ad1980: 可是剛好亮到要看的 bands 很麻煩,無法比較蛋白量。>"< 03/03 12:39
ad1980: 我通常都 blocking 一個小時,應該夠吧?@@ 03/03 12:39
ad1980: 像這個上半完全看不清楚 QQ 03/03 12:57
ad1980: http://imgur.com/KWuNo8T.jpg 03/03 12:59
blence: 我覺得會這樣還有sponge厚薄不均影響transfer時的效率 03/03 13:18
as862437: 有可能有氣泡嗎? 03/03 14:59
ad1980: Sponge 厚薄會影響啊?但我們實驗室的是很大一塊剪出來的 03/04 00:40
ad1980: ,照理說都一樣,有幾次顯影後染紅看,transfer 看起來是 03/04 00:40
ad1980: 沒問題。 03/04 00:40
ad1980: 轉之前有用 glass pipettes 桿過應該是沒泡泡 03/04 00:41