[求救] 想請問有人有養過DC 2.4 cell嗎

[shinney (努力向前)]

發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題

若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除

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恩 最近回實驗室作實驗
第一次養DC 2.4 cell line
但是沒有看到這株細胞的相關培養詳細內容
我指的是 型態 培養詳細方法
(我知到培養液等等內容 paper上的
沒有在ATCC上看到這株細胞 也許是我的keyword不對)

目前解凍 換過一次培養液
把它用另一種樹突細胞來養
覺得這個細胞是懸浮型 因為不太貼
圓圓聚集
我是以懸浮細胞的方式來養
吸培養液=> PBS wash dish ==> 離心 1000rpm 5min
==>倒掉上清液==>稀釋養入10cm dish
如何看這類細胞長滿
沒有任何cytokines treat的狀態下
應該看不到樹突的延伸 就圓圓 飄阿飄
希望大家可以分享賜教一下 覺得它有點weak
感謝大家



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※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1457344385.A.2CF.html
→ lesswind: medium是用哪一種?配方可以貼上來看一下嗎?
→ lesswind: 這種細胞是貼附型的
→ lesswind: 細胞型態應該為紡錘型~有處理才會伸出樹突
→ shinney: 學姐叫我自己查 但我沒找到觀察了一兩天 都不會貼
→ shinney: the murine DC line,DC 2.4 adhere to the C57BL/6 bone
→ shinney: medium RPMI 1640 with100U/ml(P/S) 2mM glutamine10%FBS
→ shinney: 恩 我覺得應該是懸浮型的 因為解凍後放三~四天細胞不太貼
→ shinney: 但還是沒死 我是用別人養DC cell line的方式養但不同細胞
→ shinney:  我找了很多但找不到這細胞的相關型態只好求救
推 lesswind: 我之前碩班有養過DC2.4好像medium還有加其他東西2-ME跟N
→ lesswind: NEAA 丙酮酸 然後絕對不是懸浮~會飄就是死掉了~
→ lesswind: 然後之後都是做primary culture去取骨髓讓單核球分化成
→ lesswind: 樹突細胞~
→ shinney: 恩 透過同學找到一個碩班學生的論文 他說是半懸浮型的
→ shinney: 不過 今天先分成兩盤 比之前的貼附情況好點 明天再觀察
推 jabari: 照理講.. dc應該很會貼 給他一點時間?
→ shinney: 恩會貼但沒有紡錘狀 就圓的 邊邊有小觸手爪盤子
→ shinney: 恩 就跟老師之前發的paper上的DC一樣
→ shinney: 大家會去算細胞的doubling time嗎 今天學姐問我這
→ shinney: 我以前碩班不會去算這個 哈哈
→ shinney: 如果要算這個是要幾個時間點最理想呢 目前是想24 48 72 h
推 jabari: 剛入手的細胞會去算 因為這樣週末才不用加班 XD
推 antibiotic: 我們實驗室有特別用liquid medium去養