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人類骨髓MSC 以alpha-men +16.6%FBS+1%三合一抗生素培養 繼代時用0.5ml trypsin/10cm dish作用3min 以auto-pipette沖下收集並離心 數完細胞回種 隔天發現細胞都不貼盤 請問可能出了什麼問題?? 謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.57.147 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1457511666.A.42D.html
dkal6: 索性改3D Culture吧(大誤~ 03/09 16:22
goodday06: 第一代有長到快八分滿嗎? MSC 很好貼 不貼可能死了... 03/09 16:50
goodday06: 分盤時的密度? 分盤比例? 03/09 16:51
w175n57: 有到8分滿才分盤 03/09 17:01
w175n57: 通常是1分10 03/09 17:01
w175n57: 打下來要種到6 well做實驗的也不貼 03/09 17:02
goodday06: 一分10太稀 而且如果你門沒有特製配方 MSC 不好養 03/09 17:05
goodday06: 甚至1分2 1分3 還得長很久 03/09 17:06
goodday06: MSC 配方很多種 養起來生長速度也差很多 03/09 17:13
lail: 1分10太稀… 03/09 20:25
w175n57: 為了避免MSC老化 而用低密度培養 03/10 14:55
w175n57: seeding的細胞有一定數量 也不會太稀 03/10 14:57
goodday06: 你們lab有成功培養過嗎? lab過去的人也這樣養嗎? 03/10 15:55
goodday06: hBM-MSC 直覺上還真是不易取得的材料 03/10 15:56
goodday06: 數一數再種很謹慎不錯 可1分10大多人會覺得太稀 03/10 15:58
goodday06: 長很快的細胞才會這樣分 03/10 15:59
w175n57: 之前1分20也有成功 最低有種到10000/10cm dish 03/15 16:41
joseph103331: 以前看別人養大約4000~5000cells/cm2會比較好 03/26 17:07
joseph103331: 不過今天的原因是不貼, 是否trypsin作用太久了呢? 03/26 17:08