作者hachibuya (黃金騎士 牙狼)
看板Biotech
標題[請益] western blot 和FACS結果不同?
時間Fri Mar 18 15:23:38 2016
FACS部分我用4% PFA固定再用 0.2% triton打洞
染抗體跑FACS後 control組和實驗組的表現有明顯差異
但之前別人跑的westen blot結果卻是沒有差異
抗體是anti-integrin alpha5
FACS和westen是用不同的抗體(剛好沒有能同時應用在兩種方式的抗體)
我的想法是triton打洞後所有的蛋白質都染得到
這樣的話westen blot和FACS的結果應該是一樣的
還是說躲在細胞核裡面用triton後還是染不到所以會有這樣的差異?
不知道有沒有人做過這樣子的比較的?
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推 qiet: western blot自己跑看看 03/18 17:32
→ lail: 推樓上的,自己收一次sample自己做一次WB 03/18 19:56
推 greenmoon00: 通常是protein特性的問題,integrin是alpha beta的di 03/18 20:04
→ greenmoon00: mer,會不會dimer的關係造成的差異啊 03/18 20:04
→ Ice9: 兩個不同抗體,辨認位置一樣嗎?製作方式呢? 03/19 10:31