[求救] 重組DNA

[childlike107 (childlike107)]

請問

用限制酶切開原載體與目標基因
將目標基因與pcDNA3.1(+)接合,轉型,純化DNA
之後將質體DNA transfection至細胞表達

中間過程需要PCR嗎
還是這樣就可以表現?




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→ xxtomnyxx: 目標基因音如果不是 PCR 來的，整個過程就不需要 PCR
推 e104582001: 只要你的target gene 已經存在於其他vector就不用
→ childlike107: 切下targer為 切位+序列..ATG...序列+切位 送pcDNA
→ childlike107: 序列非一開始即ATG有影響嗎   感謝
→ Ice9: 你要確定一下從ATG開始之後的蛋白序列是不是你要的。
推 joseph103331: reading frame是對的就行了,切完跑個電泳分離一下吧