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不好意思,想請問各位版友關於agar plate的問題。 我們實驗室過去做agar plate的方法是滅菌後等LB-agar稍涼後,加入抗生素, 然後倒25 ml至plate,斜蓋上蓋後靜置40分鐘左右, 再將plate倒置封上石蠟膜,放至cold room保存。 使用前半小時會先將plate拿出至chemical hood抽氣去除水氣。 之前一直都這樣做,都可以順利養出菌。 但這幾天養菌時發現agar plate會出水,有水滴出現在agar本身上面, 嚴重的甚至會流動。 有些是塗盤前便有這種情形。 有些是塗盤前無異狀,但塗盤培養數小時後才發現有水滴出現。 不知道大家是否遇過相同情形? 想請問我該如何改善此狀況?這跟我做plate的步驟有關係嗎? 另外有借別人的plate來養,但一樣有出水的狀況。 也有參考別人的方式,塗盤前先將plate拿至培養箱回溫,但一樣有出水情形。 謝謝大家。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.121.113 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1463406109.A.D4B.html
roy047: 做好後放到cold room保存前我是會倒置放乾兩小時左右 05/17 04:01
patricksky: 通常升到室溫 就不大會出水了 至少手摸起來沒涼度 05/17 08:48
patricksky: 嚴重出水通常是放在冰箱太久 拿出來抽氣也不會乾 05/17 08:49
patricksky: 然後plate狀況也不好 05/17 08:49
MrWonderful: 謝謝回覆。不過這批plate才做,還不到三天。 05/17 10:33
MrWonderful: 原本也想說是做plate的問題,但借的plate也有此狀況 05/17 10:36
MrWonderful: ,就讓人有點不解。 05/17 10:37
osla30: 我們拿出冰箱後,會放55度烘箱,倒置半開蓋烘10分鐘 05/17 22:31
Kiwigogo: 培養溫度呢? 我養42度一定潮到出水 05/17 22:39
MrWonderful: 啊……我們沒有養菌專用烘箱。 05/17 23:45
MrWonderful: 培養溫度是37度。 05/17 23:45
osla30: 不用呀,就一般烘箱,器具滅菌完烘乾的那種就好了,烘完 05/17 23:57
osla30: 塗盤 05/17 23:57
MrWonderful: 我們是用公用烘箱,別的實驗室對養菌的plate有顧慮。 05/18 01:29
osla30: 好吧沒輒,不過我們也公用的,這邊其他人倒是沒什麼疑慮就 05/18 07:50
osla30: 是了 05/18 07:50
mosu0714: 凝固後就先吹乾勒? 我覺得凝固後直接放冰箱真的很容易 05/18 18:32
mosu0714: 潮到出水 05/18 18:32
mosu0714: 而且拿出冰箱後要吹至少2個小時才能乾.... 05/18 18:33
chvkimo: 是冰箱漏水嗎? 才做完三天就濕成這樣 05/19 10:36
MrWonderful: 我之後會試試放久一點。希望能改善出水狀況,謝謝 05/20 11:20
joseph103331: 我都是放overnight之後才收... 05/22 12:32
Ice9: 我們lab也是凝固後倒放o/n到一天(室溫),才收進袋子放冰箱。 05/23 23:43
Ice9: 塗盤時上蓋有水汽,頂多上蓋過過火去潮,就没多大事。 05/23 23:47
Ice9: 之前正常,之後不正常,那肯定是之後做的有變數存在。 05/23 23:49
b1l3hlkff: 不要封石蠟,用前先在抽風廚曬一下 05/26 02:03
tsuyo0105: 放overnight之後才收+1 06/14 00:11