[求救] 關於石蠟切片與冷凍切片的比較問題

[anber2010 (anber)]

各位好，但因為工作的關係必須了解冷凍和石蠟切片的差異
其中關於切片厚度與機台操作的細節，始終無法理解也google不到
想請教各位實際使用過的人幫忙解惑
我是紮實的門外漢
如果問了太門外漢或是不專業的用語請小力鞭 > <


我想詢問的問題關於石蠟切片與冷凍切片的比較，我的理解是否正確？

*問題一：為什麼冷凍切片的建議厚度是10~30um，無法像石蠟切片的厚度一樣3~5um這麼薄
?

  =>我的理解 (1) 冷凍後的組織較硬脆，
                   所以人員操作上不容易薄片又切的平整光滑
     (2) 冷凍後的組織容易受到冰晶影響，
                   裁切時候如果太薄遇到室溫的瞬間薄片軟化，容易使得組織破掉
      
*問題二：生物組織體的切片的厚度要如何定義？
         為什麼資料說細胞密集的薄切，纖維多細胞稀的可厚切？

   
*問題三：冷凍切片時，將冷凍包埋的組織體放在機台上時，
         加入一種液體讓組織體固定在低溫的平台上
       （看起來像快乾這樣膠狀體），請問這是什麼液體？
  =>我的理解 是ＯＣＴ冷凍包埋組織，
                 同時ＯＣＴ也是用來固定平台，可在低溫中快速結凍
       （參考影片https://www.youtube.com/watch?v=3l00yk51Pps ） 

*問題四：切片機有直立切和橫切兩種。
        直立式的切片機跟上圖橫切的切片機功能有差別嗎？
        厚度？或是組織體？或是冷凍或石蠟用的應用差別？

再麻煩各位了！感謝


         









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※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1465001145.A.D78.html
→ anber2010: 第一次手機排版，發現出現好多？？，不知道怎麼修改，
→ anber2010: 格式也怪怪的…閱讀不便請見諒。
推 goodday06: 蠟切的樣品已經通常已經福馬林浸泡、石蠟包埋
→ goodday06: 可切較薄 可是冰凍切僅OCT包埋 樣品較軟弱 無法切太薄
→ goodday06: 切厚薄視技術及需求 達到目的、結果清楚 不一定要超薄
推 tz2733: 1跟組織切片前的處理有關 冰晶是細胞內水份造成 有些實驗
→ tz2733: 冷切前組織有先處理置換細胞內水份  就也是可以切薄一些
→ tz2733:  但蠟切的前處理更多步驟 可切更薄 你可以查一下蠟切前處
→ tz2733: 理的資料 2可從切片後是要看細胞的樣子排列等角度去思考
→ tz2733: 問題 但有時切片多厚跟是什麼組織比較有關 一些比較難切
→ tz2733: 的組織要切薄也太考驗技術了...3對 是OCT 摸起來像膠水...
→ tz2733: .低溫變白凝固 4都用過但不太清楚差別 平切那種似乎無法
→ tz2733: 像垂直切的機器可以切連成一長條的...
推 tz2733: 補充 我是指蠟切直切可以連成一長條...冷切還沒看過
推 michealking: 你要切之前也要找人帶你切 直接問帶的人吧
→ goodday06: 還沒找人帶  早一步做些功課也不錯啦
→ goodday06: 有些地方是得到處求神拜佛  憑空構築出流程
→ goodday06: 做些功課再拜託人帶  比較有學習的誠意
→ ghjkl5566: 你兩種都做過後就會知道 福馬林固定後的檢體很堅固
→ ghjkl5566: 所以切薄沒什麼問題 而細胞多的要切薄是因為厚檢體
→ ghjkl5566: 細胞堆疊太多層會很難看 而結締組織這種很透的基本上
→ ghjkl5566: 不影響觀察 所以可以切厚 順便讓稀薄的細胞多一些
→ ghjkl5566: 比較好觀察 而其他的問題基本上你問帶你的人就可以了