[求救] DNA疑似污染

[nellnell (小厚)]

小弟最近在做transfection 用的是K2 reagent
結果剛剛去拍照 發現都死光了..
不過神奇的是control組跟其他沒用到的well(我是種在96 well)都活的好好的，所以助理
說可能是DNA或是transfection reagent有污染

想請問有沒有人有這種經驗 DNA跟reagent又該怎麼測試呢？
另外抽midi的時候也不是在無菌室抽的 照理說沒那麼容易污染 覺得很納悶..
或是還有其他可能也請不吝告知
謝謝 ><

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.73.209.15
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1466151172.A.F23.html
※ 編輯: nellnell (42.73.209.15), 06/17/2016 16:14:12
→ e104582001: 所以你之前有其他細胞轉同一支vector進去過嗎?
→ e104582001: 說不定是你帶的基因導致死 cell death
→ e104582001: 通常 transfect 所需要的DNA量都不太會導致汙染
→ Ianthegood: ctrl沒死所以不是reagent吧?
→ nellnell: 回e大 但是連pcDNA跟GFP都死了 滿納悶的..
→ nellnell: 之前沒有做過 這是第一次做
→ nellnell: 回lan大 我的control是什麼都沒加 連reagent都沒有QQ
推 Bows: 什麼都不加不叫control,pcDNA or pGFP(看你載體用那個）才叫
→ Bows: control
→ osla30: 空載體都死，那就是reagent了吧？
→ xxtomnyxx: 把配製 transfection mixture 的 serum-free medium 換
→ xxtomnyxx: 成新的
推 darrenyo: 把DNA reagent 跟 serum free medium 丟到medium養看有
→ darrenyo: 沒有汙染
→ darrenyo: 分別
推 b1l3hlkff: 你有去掉dna 的endotoxin嗎