[求救] ELISA 測出來濃度太低

[shinney (努力向前)]

發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題

若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除

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恩 今天做ELISA的test 測完不論稀釋與否都很低
standard curve有做出來 漸層的變色
是收的濃度不夠嗎
因為我看論文 如果DC mature會release IL12
所以做法是 藥物treat在6well plate 每兩天換掉一半的培養液 再補入含藥
養六天 但每個濃度只有一 WELL
 是藥物真的沒效嗎 還是有別的測試的方法 除了跑FLOW
或者 有其他可以提高收集濃度的辦法
感謝

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 118.232.15.219
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1466523758.A.372.html
→ IMR32: 我有遇過類似的問題，但對像不是你的蛋白，之後是細胞培養
→ IMR32: 時，除了sodium bicarbonate，另外補25mM HEPES，就好了
→ IMR32: 廠商給的標準品標明是要在ph9的sodium bicarbonate溶液中
→ IMR32: 不清楚你是不是也是相同的問題
→ raiyu: 可以用濃縮管濃縮
→ shinney: 我是用RPMI的培養液 FBS 但培養液是之前泡的
推 o81628: 並不是每個antigen刺激DC都會分泌IL-12，IL-12會讓T cell
→ o81628:  分化成T help 1
推 o81628: 我在做的時候加藥處理都24小時，DC受到刺激活化時間不會
→ o81628: 太久，加藥處理6天有點誇張
推 jabari: 就..cDC被打成pDC   (逃)
→ pandagod: 抓一下反應的時間點