[求救] 限制酶一起進TBE膠跑～Band會歪斜

[eric0120000 (小e)]

抱歉！第一次在本版上發問有踩到雷，或有人問過先說聲抱歉因為沒搜到...

問題
http://i.imgur.com/cGvw23L.jpg
用0.5X TBE 2% agarose 100V直接跑含有限制酶截切過的PCR產物（沒純化.酵素還在裡面）

結果發現看起來在primer dimers的地方好像都會有不明壓力把band擠歪，詳細如下：

（DNA＋2X Ampliquin Mix Red＋Primers＋水的產物直接用限制酶＋對應Buffer，作用
完後直接跑0.5X TBE 2%agarose 100V膠30min）

在確定不是膠沒做好的前提下，發現不管跑幾次都會像圖片這樣歪斜把ladder跟產物擠掉

像是以前跑的也會有同樣情形
http://i.imgur.com/F26LP3J.jpg
應該也不是TBE容液沒配好，請問有解嗎？

不知道有沒有漏講什麼隨時補充～感謝


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※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1466746661.A.920.html
→ blence: TBE不用1X卻用2X的理由是？
推 leoblack: 歪斜通常是因為RE buf的鹽影響,純化過會改善
→ eric0120000: 感謝！2X 說錯是0.5xTBE、膠是2%
→ Ianthegood: 你真的用2x tbe跑就不會被re的鹽影響了
所以如果我提升TBE跑膠的倍數理論上鹽類影響band歪斜可以獲得改囉？我來試試
→ yesno1011: 可以在產物裡面加限制酶用的Buffer調整鹽度
感謝！好～我來對看看原產物裡面到底含有哪些鹽類可以透過Re buffer來調整濃度～
※ 編輯: eric0120000 (140.112.60.5), 06/24/2016 16:34:24
→ yesno1011: 講錯了QQ  是在沒限制酶Buffer的部分加 (如Ladder
→ yesno1011: 反正就是把所有泳道的鹽度調到差不多就可以了
→ eric0120000: 好唷！感謝大大們的幫忙
→ xxtomnyxx: 該不會是 NEBuffer 吧 XD
→ xxtomnyxx: 如果只是切 RE 確定 DNA 是正確的而不是要做 gelextrat
→ xxtomnyxx: ion 的話，我都用總體積 5 uL 去切，之後用水稀釋到 15
→ xxtomnyxx: uL 才拿去跑膠，這樣也是能改善。
→ eric0120000: 有NEB也有CutSmart!感謝提供這方法我會試試看！