[求救] 請問如何動態追蹤細胞是否複製？

[LIAR (玻璃做的大叔)]

我取了腦組織做培養，primary不會太純，只少astrocyte一定有，
平常都有ARA-C抑制生長，如果沒加的話，過一星期就會看到滿滿的非神經細胞。

現在我觀察到細胞成團，而且會越來越大，所以有兩種可能

1.replication，可能Cytarabine沒能完全抑制
2.migration，就只是旁間零星細胞的聚集

如果用brdU固定染色就只有一個時間點，我想用timelapse追蹤確認
請問哪些辦法，可以持續追蹤一個增大的細胞團是因為複製或別的細胞移動聚集？

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"Don't hate the player. Hate the game."
當看到哪個名人賺了大錢，領到高額補助或利息，不要去指責他，
而是要指責那個制度、創造那個制度的人，以及默許那個制度的人。

不然你認為一個人不領18%或是一個人不炒房價，就會改變整體環境嗎？
還不如改變【修改制度的人】，才能從根源改變一切。

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推 jabari: 去買一台Lonza的Cytosmart 就可以啦... $$$$
→ LIAR: 唉！有錢大家都可以發seience了，說點沒錢的方式吧XD
推 captdavince: 你可以用染的，cell tracker, 染了再養，有很多種
→ captdavince: qdot的比較貴，但是如果是replicate的話螢光強度減半
→ captdavince: 的趨勢好像比染料的好.
推 payton103075: 若migration的細胞有特定maker 可以染活體螢光看不
→ payton103075: 時間 看是否有移動以及細胞團是否有螢光出現?
推 goodday06: timelapse microscopy 直接觀察?
→ LIAR: 我們有timelapse，但懸浮球的xyz很難定位，又會旋轉...
→ Ianthegood: 對啊pulse chase的染色 hoechst染核就可以了吧
→ LIAR: 不過隨時間不分裂hoechst也會弱掉吧？我應該如何比？
→ LIAR: 而且顯微鏡螢光不是最好別定量？
推 Ianthegood: 上flow? 再用fixed又染過的細胞當control
→ goodday06: sorter 分離不同群細胞--> 螢光dye標定特定細胞
→ goodday06: -->再混合回去養-->追蹤螢光分布
推 h3250sam: 染CFSE這種CellTrace dye，分成實驗組和抑制分裂的
→ h3250sam: control組，收細胞上flow看螢光強度，沒分裂的話螢光強
→ h3250sam: 度應該會和control一樣，有分裂就會呈現螢光衰減分佈
推 h3250sam: 還可以配合特定marker進行複數染色，區分出不同細胞群