[求救] 請教石蠟包埋皮膚IHC noise如何降低

[diablojason (逆風)]

最近在做BL6誘導皮膚產生乾癬

以IHC染 T cell marker，例如CD4 (1:5000)

但發現DAB呈色後，control(正常皮膚)還是會呈色

http://imgur.com/1oEt8qP


之前有試過不要加一抗，直接DAB

結果也會染上去

我是用Thermo IHC kit

也將第一劑的 h2o2 以及第二劑 blocking 時間拉長

但還是無法改善此情形，附上誘導後之影像

http://imgur.com/aQLrBAv



此圖是H2O2作用一個小時的影像

http://imgur.com/Lqn29u4


謝謝各位大大

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 210.242.68.175
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1476978305.A.C9E.html
推 johanjohan: 沒意外的話這套kit應該是設計給human tissue，同時可
→ johanjohan: 認到rabbit/mouse的一抗，所以用在mouse tissue可能就
→ johanjohan: 會有背景。
推 Kunhanli: 請問組織是什麼物種？抗體Host?
組織：bl6 skin ; antibody host: anti-rabbit

謝謝
※ 編輯: diablojason (211.72.50.182), 11/02/2016 05:40:53