[求救] HCl泡過後DAPI會沒法染

[LIAR (玻璃做的大叔)]

我現在在做BrdU的蠟切，protocol中需要HCl去DNA denature，
根據ABCAM，我用2M HCl泡1小時，對照組用PBS。

曝光，沒有泡HCl的強度爆表(4095以上)，泡過得不到200。

這是泡過HCl
http://tinyurl.com/hd2usdk
http://tinyurl.com/jt62prf

沒泡HCl
http://tinyurl.com/zubm3of
http://tinyurl.com/zvl3lvu

看來HCl也會破壞DAPI的效果，請問各位染過BrdU蠟切片的，denature條件
都抓多少呢？

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"Don't hate the player. Hate the game."
當看到哪個名人賺了大錢，領到高額補助或利息，不要去指責他，
而是要指責那個制度、創造那個制度的人，以及默許那個制度的人。

不然你認為一個人不領18%或是一個人不炒房價，就會改變整體環境嗎？
還不如改變【修改制度的人】，才能從根源改變一切。

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→ e104582001: 我怎麼記得DAPI是要卡在dsDNA中
→ LIAR: 可是一般IF也適用HCl去處理，兩個可同時染
→ e104582001: 我做過的IF從來沒有用過HCl...
推 cyc5566: IF為什麼要用HCl?
推 tynse71864: IF沒有吧！？
→ williamyang: 若是用EdU做click reaction就不需要HCl
→ soom: 試試加0.1 M sodium borate pH 8.5, 室溫30分 去中和HCl
→ soom: 另外，BrdU染色需要denature DNA所以需要HCl
→ LIAR: 不能只有PBS去洗HCl嗎？ABcam也說sodium borate是option，
→ LIAR: 我以為不重要。