[求救] lentivirus concentration

[markonly (badguy)]

各位好~小弟我因為lentivirus的titer不夠所以做了concentration，

但是re-titration後，titer好像沒有高多少，應該是我concentration失敗了，

我想請問是否有人做過virus的concentration?

可否給小弟一些建議?

以下是我concentration的步驟
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材料: Spin-x UF 20 Spin tube

1.用無菌水prerinsing 3次。

2.將病毒在室溫下解凍。

3.將病毒取到 tube 裡。

4.用 3000g，4度，離心，每3到5分鐘檢查一次。

5.當病毒液到我要的量的時候停止離心。

6.使用0.2 filter 過濾病毒。

7.存放在 1.5ml 冷凍管，並放在4度冰箱，兩天後開始進行titration。
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如果我步驟上有問題，還請各位不要客氣，用力鞭下去就對了!

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推 shelix: 先濃縮再冷凍?
→ soom: 4度C放兩天好像久了點
推 poison7202: .2 um filter?
推 MDCCLXXVI: 濃縮管 MWCO多少呢
推 wanderchang: lenti比200nm小吧
→ silverberry: 四度放太久了，病毒離開活體死得快~
→ silverberry: 哪個系列的載體包的? 比例如何?
→ silverberry: .22 filter 是 PVDF or PES or?
推 freedomk0115: 用簡單的glucose gradium搭配高速離心就可以解決了
→ homeshawn: 個人好奇這樣加速減速對病毒的套膜會不會有損害@__@
推 silverberry: 之前用過超高速離心收，PBS均勻懸浮以後直接凍-80
→ silverberry: 後來感染起來也沒什麼問題