[求救] partially assembled IgG純化

[ohyeh1021 (史前巨熊)]

各位先進好
最近在做antibody(hybridoma)的純化
發現在protein A的elution中有partially assembled IgG(2H1L,1H1L)
應該要再做什麼column的純化
(IEX, HIC or SEC)


大概流程:
1.收集上清液(serum-free,離心去細胞)
2.protein A purification
(binding buffer:20mM phosphate, 150mM NaCl, pH=7.0)
(Elution buffer:100mM Glycine-HCl, pH=3.0)
3.buffer exchange to PBS by Amicon
4.PAGE--->發現partially assembled IgG


感激不盡!!


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推 huangsw: 總體積大嗎? 不大的話跑個SEC應該可以很純