[閒聊] 詢問大腸桿菌BL21(DE3)表達重組蛋白

[liberty5556 (赫拉克羅斯)]

http://i.imgur.com/4PlsdE0.jpg
問題是這樣的蛋白預計分子量為38kDa.(不含6x his )
但實際跑SDS-PAGE
目標片段跟marker比對。卻是介於40-55kDa..
請問該如何解呢

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推 satantaco: 合理 請想像1.膠體的3D立體結構  裡面有空隙 讓蛋白質
→ satantaco: 在裡面跑 一樣分子大小蛋白質 折疊的比較密的 跑比較快
→ satantaco: 比較鬆散的 跑比較慢2.分子量大小一樣 電性可能不同
→ satantaco: 電泳跑快跑慢 很難說3.分子量標準品是某個蛋白用作比照
→ satantaco: 所以某個片段大小  是相對位置 不是絕對位置 只能說應
→ satantaco: 該在差不多位置附近  而不是絕對位置4.6XHIS也是有大小
→ liberty5556: 了解！感謝你
推 Ianthegood: 帶正電比較多的蛋白會跑得比較慢 壓個western或打個MS
→ Ianthegood: 確認?
推 asd03082002: 或者確認一下有沒有看對marker，遇過有人不管用什麼b
→ asd03082002: uffer跑膠都看同一組，有時候就是band上面或下面的差
→ asd03082002: 別