作者tina62119 (wewennn)
看板Biotech
標題[求救] coomassie blue band 反白
時間Wed May 3 10:00:13 2017
不好意思想請問一下各位前輩
我跑了8%的SDS膠(沒有加gelatin)
（protein的量是50ug/20ul)
因為不太確定protein位置
所以想染coomassie blue看看
(reused 一次的染劑 室溫搖晃染30分鐘 用ddH2O 室溫搖晃退染一天）
結果染出來的band不是藍色
而是呈現和染gelatin 時一樣的反白狀
因為是第一次出現這種狀況
爬文也只有看到有人問過Western 的band反白
估狗也沒有找到答案
想請問一下有人知道為何會呈現反白嗎？
或有人也有類似經驗嗎？該如何解決呢？
謝謝
http://i.imgur.com/oMSxSNG.jpg
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推 tynse71864: 我記得退染是用50%MeOH+10%HOAc吧？ 05/03 13:07
→ tina62119: 因為之前也是用水退 不過是第一次這樣 05/03 15:41
→ tina62119: 謝謝建議我下次試試！！ 05/03 15:41
→ Ianthegood: 我也記得是醋酸 不過這跟你的染劑配方也有關係 請goog 05/03 16:28
→ Ianthegood: le自己的染劑配方 05/03 16:28
→ blence: 有些公司會賣G250配好的整瓶,就有建議用水退染即可 05/03 17:04
推 icheee: 確實是有那種商品 simply blue 是用水退染即可 05/03 18:18
→ Ianthegood: 我有疑似是simply blue的recipe 裡面是etoh跟g250 不 05/03 21:20
→ Ianthegood: 過simply blue不會把背景染成那樣 05/03 21:20