[討論] 關於胞外internal control

[s908322001 (小負)]

各位先輩 各位強者大大大家好

今天對外報告我做的實驗

其中有一個實驗是看細胞胞內胞外蛋白表現量

其中胞內沒什麼問題

就是收細胞定量跑WB，internal control就用蛋白骨架

胞外就是收下condition medium 然後使用濃縮離心管將多餘的medium離下來

然後依照藥物濃度組別load gel，也可以知道藥物濃度越高，胞外蛋白越少

但是剛剛被質疑沒有control，不過實驗室歷年來都是用各個濃度的組別比較

沒加藥的組別，所以想請問各位強者，胞外蛋白有internal control嗎?

還是我們實驗室的做法其實就可以了


先在這謝謝各位了

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推 Bows: total protein也可以，可以用ponceauS 或有些膠可以直接顯出
→ Bows: 蛋白量
推 tynse71864: 同1F; 若PS染不出東西， WB抗體壓完再染 CMB也可
→ memory0907: 可以用Fascin-1
→ Ianthegood: 同上total protein 太少就銀染吧
推 joseph103331: medium有加血清嗎? 全蛋白質測定可能會有血清影響
→ joseph103331: 我覺得只要將各組別的細胞量拿出來做normalize就好
推 m21115: 想問一下要怎麼將細胞量定量？刮下來用BCA定量可以嗎？
→ Ianthegood: 要抽完protein才能測啊 直接BCA細胞也太狂XD
推 tynse71864: j大應該是指細胞數吧？
推 joseph103331: 我是覺得用細胞內的細胞骨架來當作細胞數normalize
→ joseph103331: 就好,但如果還是被質疑的話也只好數細胞了