[討論] 關於藥物對細胞型態影響的問題

[s908322001 (小負)]

各位先知大家好


小弟我目前的主題是找中藥治療肝癌


在測毒性時實驗室是用MTT assay 來篩出中藥對細胞的IC50


然後再用低於IC50的濃度來做接下來的實驗，然後最近的一個問題是


之前做了螢光染色來看F-actin 能否被抑制

結果control組很正常的細胞型態表現

但是在加了1/2 IC50 的組別細胞F-actin明顯小於ctrl，

但在核質的大小上明顯小於control


而在另一個實驗cell poliferation assay 上


在1/2 IC50 組別中， 加藥第一天細胞並無增長的跡象

但是在第二天的組別中就掉到跟IC50 同樣的數值


我這邊是用 MTT 來做的，但是在MTT 1/2 IC50 也有存活率 80% 左右，

而且有一次測poliferation 是忘了做 day0 組， 但是那次的 1/2 IC50 組別又是

完美的 細胞數持平走向


也因此讓我懷疑是否這藥是可以破壞細胞穩定型態的功能

所以我想問的是，是否有什麼辦法可以證明這藥可以破壞細胞的附著力或是型態的穩定?


也希望有涉略這方面的先知們能給個關鍵詞之類的讓小弟去了解一下相關知識

謝謝各位

--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.122.136.124
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1502869627.A.2AD.html
※ 編輯: s908322001 (140.122.136.124), 08/16/2017 15:52:57
推 ampicillin: 一下F-actin一下proliferation最後跳回adhesion
→ ampicillin: 也不是說都無關，只是這邏輯也太跳痛了吧 @@
→ blence: 同樓上,實驗的操作難意會,實驗結果的解讀也不好理解
對不起啦，這是剛剛meeting 的時候想的，當時思緒不夠好闡述一些腦中的問題

http://imgur.com/a/J63AQ 這是螢光染色的圖，有一張加藥後(1/2 IC50)的

細胞核和質明顯變小，學長說這可能是細胞要凋亡的現象，不過在測MTT的時候

1/2 IC50 的細胞存活率卻有到快 80%，所以才會想到上面的問題，對不起各位
※ 編輯: s908322001 (140.122.143.253), 08/16/2017 19:50:08
→ williamyang: MTT的結果不等同於apoptosis
→ aj1139: 這照片細胞型態也差太多，就算apoptosis時細胞會縮，也沒
→ aj1139: 有這麼誇張吧。怎麼覺得好像滲透壓有問題（亂猜）
→ aj1139: 個人建議去確認一下配置藥物的buffer、濃度、pH值、溫度
→ aj1139: 還有這兩張圖染色時候使用的試劑有沒有問題。
推 ayenyayaya: 感覺就單純的不健康要死還沒死？
→ ayenyayaya: 單純看adhesion 可以看focal adhesion 的marker