[討論] westernblot running gel band 歪斜

[libidoor (Anti de Sitter)]

如題，爬文找資料以後，
覺得還是不清楚問題出在哪裡。

最近 band 在靠近 gel 兩側的地方常常往上翹約30-45度。以下是我的條件，還請板上同
仁請教:

Running buffer: 沒用過，三週前泡的。
Voltage: 不管是 60 80 110 跑完全程都一樣（110有先用低電壓跑過線）會歪斜。

Gel: Bio-Rad commercialized protein gel. 都是用新買不到一周。

Sample: 體積固定為 10 或 20 ul， marker 分別為 7 或 14 ul. （之前跑10， 20 或
40 ，marker分別為 7 或14，都沒有問題。最近想說歪掉了才調整成10ul，但還是有問題
）

有額外發現到的是最近金屬線冒泡比以前多一些，以前80 volt看不太到冒泡，最近80就
像以前120一樣冒很多。

不知道以上環節是否哪裡最有可能導致 band 歪掉? 還是有其他原因?

謝謝大家!



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你和那些反年改團體


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→ Ianthegood: 就不要跑最邊邊兩個lane啊
→ roy047: 正常 tank電極設計問題
→ aj1139: 你用什麼壓膠？
→ blence: precast gel還浪費lane很不值得
推 joseph103331: 可以試試全程放冰箱+80V左右去跑
→ joseph103331: 自製的高趴數膠這樣跑都很直很漂亮
→ Ianthegood: 老實講只是要收data的我才不管勒 要發paper的就浪費幾
→ Ianthegood: 個lane也無妨XD
推 aj1139: 啊我笨了，沒注意到是precast gel。跑的時候每個lane都有
→ aj1139: 東西嗎？我建議是兩邊的lane不要下sample，但要加loading
→ aj1139:  dye讓電場穩定，個人最近才跑過過期三年的precast gel電
→ aj1139: 壓200V都還OK。如果這樣還是有問題，可以找廠商確認，因
→ aj1139: 為precast gel...品質不一定一樣，可能你那批貨有問題。
→ aj1139: 。
→ Ianthegood: 最常見就是銅線老化嘛 你看銅線最兩端是不是有金屬堆
→ Ianthegood: 積 泡泡醋也許會好一點
推 cyc5566: 改成40V 慢慢跑超級直
→ chihsiao: 電泳槽那個是白金絲不是銅線
推 KoiNoUta: 可是Biorad的precast gel不是建議要用200多V跑嗎？你這
→ KoiNoUta: 樣電壓太低了吧