作者bridge850108 (bridgez)
看板Biotech
標題[求救] patch clamp問題請教
時間Sat Dec 23 18:48:20 2017
版上各位先進好,
一樣是先前在版上詢問的專討論文內容還有疑問,
google了也無法理解因此想請教各位。
測量植物離子通道實驗時使用patch clamp技術
例如從-145mV~+35mV
增加電壓區間為+30mV,60秒測一次
我想問:
1、控制電壓去測量電流的目的是什麼?觀測到的資料可以對離子通道做什麼推測?我猜
測是利用像V=IR去計算通道電阻來推斷通道開闔狀態,不知道是否正確。
2、請問為什麼要從-145~+35mV做多次不同電壓測量?不同電壓的目的是什麼呢?
3、還有想問為什麼測量鉀離子通道時多從-216mV左右開始測到+60mV左右結束,而測陰離
子通道時多從-145mV開始+35mV結束呢?請問這電壓的差距有生理上的意義嗎?
4、實驗時bath solution含有30mM CsCl,而pipette solution含有150mM CsCl(其他還有
MgCl2、CaCl2、MES、EGTA、HEPES),請問實驗是利用氯化物濃度差來造成跨膜電位差以及在離子流出時維持電壓在
在holding potential的嗎
5、作者說了'whole-cell slow-type anion currents'這個說法,我以為whole-cell是紀
錄整個細胞的狀態,請問為什麼還能針對單一S-type anion channel檢測電流呢?
6、別篇文獻提到了'Currents were identified as slow anion currents by
their kinetics and reversal potential',可是這句話的出處文獻沒有發表,教授也問
了作者是如何辨認其為S-type而非R-type anion channel?
https://imgur.com/q1TTUbC
所以我也隨便(跪)找了一張圖,a~d為S-type,e、f為R-type,想請先進們簡略解釋兩種
channel在圖表上的差異。
文獻
https://goo.gl/RY5rqQ
小弟資質駑鈍應該有非常多地方理解錯誤,
煩請各位解惑,
非常感謝!
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→ july81212: 1.概念上沒錯也可反過來控制I測V 主要是要看R(channel) 12/25 02:44
→ july81212: 3.一般Vm<150 K+與hyperpolarization跟repolarization; 12/25 02:50
→ july81212: anion與repolarization有關 12/25 02:51
→ july81212: 4.維持holding potential 12/25 02:55
推 july81212: 6.差異在activation time S-type(s) R-Type(ms) 12/25 02:59
→ july81212: R-type在靠近正常Vm時關得快導致沒有Current呈現Vshape 12/25 03:04