看板 Biotech 關於我們 聯絡資訊
想請問一下, 我做植物的基因轉殖, 是用農桿菌感染的轉殖方式。 植物材料是桉樹跟菸草無菌苗的葉片。 感染後兩天葉片周圍會長出細菌, 我加入cefataxin和carbcillin清洗後, 發覺菌量會暴增,之後怎麼洗也很清除乾菌。 最後是菌量過多掩蓋葉片,然後葉片就爛掉死了... 請問有甚麼方法可以解決?(做了一年都沒成果) 如果是菌種汙染,有甚麼方法可以可以解決? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 223.200.123.37 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1517391091.A.FE1.html
Ianthegood: 組培嗎? Ti plasmid的resistance gene是什麼? 01/31 18:28
huuban: 可能感染結束之後沒有洗乾淨吧? 02/01 00:24
huuban: 有菌冒出來就很難救了啊... 02/01 00:25
stephilow: 覺得農桿菌超難洗... 也用超音波震盪,但植物組也死了 02/01 09:42
huuban: 唔..那可以請問您都是怎麼洗的嗎? 02/02 00:20
huuban: 或者也可能是感染時間太長,菌長上來了 02/02 00:28
huuban: 菸草的話..我記得感染3-5分鐘,無菌水洗三次,抗生素一次 02/02 00:29
huuban: 無抗生素的培養基培養48小時,然後換到有抗生素的培養基 02/02 00:30
huuban: 參考中研院轉殖植物核心實驗室>實驗方法>轉殖實驗 02/02 00:35
stephilow: 感謝解答! 中研院的資料外人可以查閱? 02/03 00:50
stephilow: 另外,菸草葉片很薄,會先pre-culture嗎? 02/03 00:52
huuban: 可以唷,中研院的這個資料是完全公開的~ 02/04 23:16
huuban: 請問pre-culture是甚麼 > <? 02/04 23:17
huuban: 我習慣用50 ml離心管洗,無菌水30 ml,用力搖100下 02/04 23:18