[求救] 老鼠皮膚組織western

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想請問版上各位學長姐

把裸鼠皮膚拿去磨之後配好sample去跑western但b-actin卻不準

和實驗室學長姐討論過
覺得可能是一開始在剪皮膚時沒把黏在皮膚下的膜拿掉
導致脂肪影響actin(因為當初萃取完組織的蛋白時上面浮著一堆雜質，就算離心也無法分離

想請問這樣有什麼解決的辦法

沒做過動物實驗還請各位學長姐幫幫忙!
謝謝!!

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 36.234.10.116
※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1522675507.A.571.html
推 cyc5566: 用ImageJ定量beta actin之後逆定量回去
→ blence: 文中也沒提到怎麼(有沒有)測濃度定量...
→ es77823: 如果最後真的沒有解決辦法會用c大的方法的，謝謝！
→ es77823: 有的！有定量
推 iyorain: 加dye後多離心幾次把上層白色油脂去掉
好的會試看看！謝謝你
推 tynse71864: 想問 定量時是離完後直接取一點上清；還是會取出全部
→ tynse71864: 的上清，混合一下再定量？
我們離完心後取出全部上清 從中取一些來定量及配蛋白
※ 編輯: es77823 (120.110.127.195), 04/03/2018 13:42:33
※ 編輯: es77823 (120.110.127.195), 04/03/2018 13:48:58
推 tynse71864: 可能是不同組的 actin量本來就不同？ 換個 ctrl / 直
→ tynse71864: 接用 CMB染 membrane看總蛋白量?
我們是小鼠皮膚分成四部分，做4種處理，cmb..我會再去問看看實驗室學長姐！
※ 編輯: es77823 (1.168.87.251), 04/03/2018 22:03:55
※ 編輯: es77823 (111.82.226.73), 07/26/2018 02:04:16